en Knockin mouse definierar en djurmodell där en gensekvens av intresse ändras genom en-för-en-substitution med en transgen, eller genom att lägga till gensekvenser som inte finns i lokusen.
införandet av en transgen görs vanligtvis i specifika loci. Detta ”riktade” tillvägagångssätt orsakar mindre störningar i den transkriptionsaktiva genetiska miljön.
Knockinmöss är lämpade för ett brett användningsområde, från studier av regulatoriska element såsom promotorer till produktion av terapeutiskt användbara humaniserade antikroppar.
våra Knockin mouse model solutions
förutom konventionella Knockins där en gensekvens av intresse läggs till ett endogent locus, erbjuder vi en uppsättning vanliga lösningar:
- Quick Knockin (Rosa26 och HPRT)
full kontroll över ditt genuttryck genom att rikta in sig på de bäst studerade tillåtna loci Rosa26 och Hprt.
- punktmutation Knockinmus
påverkar funktionen hos ett givet protein (vinst eller förlust av funktion) med en eller flera muterade nukleotider
- Reporter mus
övervaka genetiska händelser, proteinfunktion, lokalisering och cellhandel
- humaniserade musmodeller
Ersätt en musgensekvens med den mänskliga motsvarigheten
villkorlig aktivering av geninsättningar eller substitutioner
alla Knockin-mönster kan bära villkor som gör att din geninsättning eller substitution kan aktiveras: A) i specifika celltyper i en viss vävnad medan andra celltyper och vävnader uppvisar ett omodifierat, funktionellt genuttryck och/eller B) temporärt vid en given tidpunkt hos embryonala, postnatala eller vuxna djur.
två vanliga tillvägagångssätt används vanligtvis:
lox-STOP-lox
Cre-rekombinaset känner igen loci för rekombination loxP som orsakar en radering av stoppsekvensen mellan de två loxP-platserna, vilket möjliggör transkription av din mutationsgen av intresse.
FLEx
både loxP och lox511 känns igen av Cre-rekombinas men lox511-webbplatser kan bara rekombineras med andra lox511-webbplatser, inte med loxP-webbplatser.
när DNA-sekvensen flankeras av lox-platser i motsatta riktningar, kommer Cre att invertera sekvensen mellan platserna. Om DNA-sekvensen flankeras av lox-platser i samma orientering kommer Cre att ta bort sekvensen.
genom att kombinera typ av lox-webbplatser, antal och orientering av lox-webbplatser som omger dina gener av intresse kan ett kraftfullt Flexverktyg skapas för dina specifika vetenskapliga behov.
när det gäller lox-STOP-lox-metoden leder uttryck av Cre-rekombinas i en specifik celltyp eller vävnad till ett vävnadsspecifikt muterat genuttryck och användning av ett induceraktiverat Cre-rekombinas leder till ett temporärt muterat genuttryck i närvaro av en inducerare såsom tamoxifen.
