En Knockin mouse definerer en dyremodell der en gensekvens av interesse endres ved en-til-en substitusjon med en transgen, eller ved å legge til gensekvenser som ikke finnes i locus.
innsetting av et transgen gjøres vanligvis i spesifikke loci. Denne» målrettede » tilnærmingen forårsaker mindre forstyrrelser av det transkripsjonsaktive genetiske miljøet.
Knockin-mus er egnet til et bredt spekter av applikasjoner, fra studiet av regulatoriske elementer som promotorer til produksjon av terapeutisk nyttige humaniserte antistoffer.
Våre Knockin mouse model solutions
I Tillegg til konvensjonelle Knockins hvor en gen sekvens av interesse legges til et endogent locus, tilbyr vi et sett med vanlige løsninger:
- Rask Knockin™ (Rosa26 Og Hprt)
Full kontroll over genuttrykket ditt ved å målrette mot de best studerte tillatte loci Rosa26 og Hprt.
- Knockin-mus
Påvirker funksjonen til et gitt protein (gevinst eller tap av funksjon) med ett eller flere muterte nukleotider
- Reporter mouse
Overvåk genetiske hendelser, proteinfunksjon, lokalisering og cellehandel
- Humaniserte musemodeller
Erstatt en musegensekvens med den menneskelige motparten
Betinget aktivering av geninnsatser eller substitusjoner
Alle Knockin-design kan bære forhold som gjør at geninnsetting eller substitusjon kan aktiveres: A) i spesifikke celletyper i et bestemt vev, mens andre celletyper og vev utviser et umodifisert, funksjonelt genuttrykk, Og / Eller b) midlertidig på et gitt tidspunkt i embryonale, postnatale eller voksne dyr.
To vanlige tilnærminger brukes vanligvis:
lox-STOP-lox
Cre-rekombinasen gjenkjenner loci av rekombinasjon loxP som forårsaker en sletting AV STOPPSEKVENSEN mellom de to loxP-nettstedene, slik at transkripsjonen av mutasjonsgenet av interesse.
FLEx
både loxP og lox511 gjenkjennes av Cre rekombinase, men lox511-nettsteder kan bare rekombinere med andre lox511-nettsteder, ikke med loxP-nettsteder.
NÅR DNA-sekvensen flankeres av lox-steder i motsatte retninger, vil Cre invertere sekvensen mellom nettstedene. HVIS DNA-sekvensen er flankert av lox-steder i samme retning, vil Cre aksessere sekvensen.
ved å kombinere type lox-nettsteder, antall og orientering av lox-nettsteder som omgir dine interessegener, kan et kraftig FLEx-verktøy opprettes for dine spesifikke vitenskapelige behov.
når det gjelder lox-STOP-lox-tilnærmingen, uttrykker Cre-rekombinasen i en bestemt celletype eller vev et vevsspesifikt mutert genuttrykk, og bruk av en induktoraktivert cre-rekombinase fører til et temporært mutert genuttrykk i nærvær av en induktor som tamoxifen.
