místo disociace tubulinové podjednotky bylo stanoveno během pohybu chromozomů poleward v mitotických vřetenech plicních buněk prometafázy pomocí fluorescenčních fotobleachingových technik a zkrácení vřetena indukovaného nokodazolem. Synchronní zkrácení všech kinetochorových mikrotubulů bylo vytvořeno inkubací buněk v 17 mikrom nocodazolu, aby se blokovala montáž mikrotubulů. Za těchto podmínek se póly vřetena pohybovaly směrem k metafázové desce rychlostí 3.6 +/- 0.4 mikrony min-1 (n = 3). Na základě antitubulinového imunofluorescenčního barvení buněk fixovaných po inkubaci v nocodazolu jsme zjistili, že nekinetochorové mikrotubuly rychle zmizely a po 60-90 s v nocodazolu byla přítomna pouze kinetochorová vlákna. Pro lokalizaci místa disociace tubulinové podjednotky byl v jednom půlvřetenu v buňkách prometafázy-metafázy dříve mikroinjekován tubulinem značeným 5-(4,6-dichlorotriazin-2-yl) amino fluoresceinem (DTAF). Bezprostředně po fotobleachingu byly buňky perfundovány 17 mikrom nocodazolem za účelem zkrácení kinetochorových mikrotubulů. Zkrácení bylo doprovázeno snížením vzdálenosti mezi bělicí tyčí a kinetochory. Naproti tomu došlo k malému nebo žádnému snížení vzdálenosti mezi bělicí tyčí a pólem. Ve srovnání s jejich počátečními délkami se průměrná vzdálenost kinetochore k pólu zkrátila o 18%, bělicí tyč ke vzdálenosti kinetochore se zkrátila o 28% a průměrná bělená tyč ke vzdálenosti pólu se zkrátila o 1,6%. Data poskytují důkaz, že tubulinové podjednotky se během pohybu chromozomů poleward disociují od mikrotubulů kinetochore v místě poblíž kinetochoru. Tyto výsledky jsou v souladu s modely poleward generace síly pro pohyb chromozomů, ve kterém prometaphase-metafáze poleward síla je generována ve spojení s kinetochore.
