前後期染色体の動原体におけるサブユニットの喪失による運動原体微小管の短縮

前後期イモリ肺細胞有糸分裂紡錘体における極方向染色体移動中のチューブリンサブユニットの解離部位を蛍光光漂白技術とノコダゾール誘発紡錘体短縮を用いて決定した。 すべての動原体微小管の同期短縮は、微小管アセンブリをブロックするために17マイクロモノコダゾールで細胞をインキュベートすることによっ これらの条件の下で紡錘の棒は速度で中期の版の方にの動きました3.6 +/- 0.4 ミクロン分-1(n=3)。 ノコダゾールでインキュベーションした後に固定された細胞の抗チューブリン免疫蛍光染色に基づいて、我々は非キネトコア微小管が急速に消失し、唯一のキネトコア線維がノコダゾールで60-90秒後に存在していたことがわかった。 チューブリンサブユニット解離のサイトをローカライズするには、狭いバーパターンは、以前に5-(4,6-ジクロロトリアジン-2-イル)アミノフルオレセイン(DTAF)標識 光退色直後に、細胞を17μ mノコダゾールで灌流し、動原体微小管の短縮を生じさせた。 短縮はブリーチバーと動原体との間の距離の減少を伴っていた。 対照的に、漂白バーと極との間の距離はほとんど、あるいはまったく減少しなかった。 彼らの初期の長さと比較して、平均運動公園から極までの距離は18%短縮され、漂白バーから運動公園までの距離は28%短縮され、平均漂白バーから極までの距離は1.6%短縮された。 データは、チューブリンのサブユニットが極方向の染色体運動中に運動子近傍のサイトで運動子微小管から解離することを証拠を提供しています。 これらの結果は,前後期-中期の極下力が運動原体と関連して生成される染色体運動に対する極下力生成のモデルと一致している。

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